สินค้า

monogalactopyranosides ของ fluorescein และ fluorescein methyl ester: การสังเคราะห์, การย่อยสลายด้วยเอนไซม์โดย biotnylated β-galactosidase และการหาค่าสัมประสิทธิ์การแพร่กระจายของการแปล

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) และ d-glucopyranoside) และ methyl ester (MFMG) ของพวกมันได้เตรียมจาก acetobromoglucose/galactose และ fluorescein methyl ester โดยให้ผลผลิตที่ดีทำการทดลองไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์ (โดยใช้ biotinylated β-galactosidase) ของอนุพันธ์ของ galacto และคำนวณค่าพารามิเตอร์ทางจลนศาสตร์ความเข้มของฟลูออเรสเซนต์เพิ่มขึ้น 15–20 เท่าได้รับการสังเกตในระหว่างการไฮโดรไลซิสมีการสังเกตการเพิ่มขึ้นของการเรืองแสงเชิงเส้นในเวลาอันสั้นและความเข้มข้นต่ำของสารตั้งต้น ทำให้สารประกอบเหล่านี้มีประโยชน์และไวต่อโพรบสำหรับกาแลคโตซิเดสขนาดของค่าคงที่ Michaelis–Menten (Km) สำหรับ MFMG นั้นสูงกว่าค่าของ FMG ซึ่งบ่งชี้ถึงการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของสารตั้งต้นฟลูออโรจีนิกที่เป็นไปได้ค่า Km สำหรับ biotinylated β-Gal ที่มี FMG นั้นต่ำกว่าค่าของเอนไซม์พื้นเมืองการสังเกตนี้บ่งชี้ความสัมพันธ์ของสารตั้งต้นที่สูงขึ้นของเอนไซม์ biotinylated เมื่อเปรียบเทียบกับเอนไซม์ตามธรรมชาติมีการวัดค่าสัมประสิทธิ์การแพร่กระจายแบบแปลสำหรับทั้งพื้นผิวฟลูออโรจีนิกและทั้งสองผลิตภัณฑ์ โดยใช้สเปกโทรสโกปีสหสัมพันธ์ฟลูออเรสเซนซ์ค่าสัมประสิทธิ์การแพร่กระจายของการแปลสำหรับพื้นผิวฟลูออโรจีนิกและผลิตภัณฑ์ไฮโดรไลซิสของเอนไซม์ได้รับการวัดให้ใกล้เคียงกันในช่วง 3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1ดังนั้นการเพิ่มประสิทธิภาพหรือการชะลอจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์เนื่องจากความแตกต่างในการเคลื่อนที่ในการแปลของสารตั้งต้นและผลิตภัณฑ์จึงไม่ปรากฏชัดเจน