ONPG CAS:369-07-3 98.0% Min White To Off -White Powder
| หมายเลขแคตตาล็อก | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| ชื่อผลิตภัณฑ์ | ONPG(2-ไนโตรฟีนิล-เบต้า-ดี-กาแลคโตไพราโนไซด์) |
| สูตรโมเลกุล | C12H15NO8 |
| น้ำหนักโมเลกุล | 301.25 |
| รายละเอียดการจัดเก็บ | 2 ถึง 8 องศาเซลเซียส |
| รหัสภาษีที่สอดคล้องกัน | 29400000 |
คุณสมบัติของผลิตภัณฑ์
| ความบริสุทธิ์ (HPLC) | นาที.98.0% |
| รูปร่าง | สีขาวเป็นผงสีขาว |
| สารละลาย(1% ในน้ำ) | สารละลายใสไม่มีสีถึงเหลืองเล็กน้อย |
| ปริมาณน้ำ(คาร์ล ฟิชเชอร์) | สูงสุด0.5% |
| การหมุนด้วยแสงเฉพาะ [α]D20(c=1, H2O) | - 65.0°C ถึง -73.0°C |
การอภิปรายเกี่ยวกับการทดสอบ ONPG (การทดสอบ β-galactosidase)
มีคำถามเกิดขึ้นบ่อยครั้งเมื่อเร็วๆ นี้: 1. เหตุใดจึงสามารถใช้การทดสอบ ONPG เพื่อแยกแยะการหมักแลคโตสที่ล่าช้าได้2. เหตุใดมาตรฐานแห่งชาติจึงระบุว่าจำเป็นต้องใช้โซเดียมคลอไรด์ไตรแซ็กคาไรด์ไอรอน 3% (หรือธาตุเหล็กไตรแซ็กคาไรด์) สำหรับการทดสอบ ONPG3. สำหรับ Vibrio parahaemolyticus เมื่อทำการทดสอบ OPNG เหตุใดจึงควรเติมโทลูอีนทีละหยดตามมาตรฐานฟังก์ชั่นคืออะไร?
บริษัทของเราได้ตรวจสอบข้อมูลจำนวนมาก สรุป และแบ่งปันกับคุณด้านล่าง:
หลักการ: ชื่อภาษาจีนของ ONPG คือ o-nitrobenzene-β-D-galactopyranosideONPG สามารถไฮโดรไลซ์เป็นกาแลคโตสและโอ-ไนโตรฟีนอลสีเหลือง (ONP) โดย β-galactosidase ดังนั้นกิจกรรมของ β-galactosidase สามารถตรวจพบได้โดยการเปลี่ยนสีของอาหารเลี้ยงเชื้อ
แลคโตสเป็นน้ำตาลที่จุลินทรีย์ส่วนใหญ่ต้องการตรวจจับเมแทบอลิซึมของมันต้องใช้เอนไซม์สองตัว ตัวหนึ่งคือ เอนไซม์เพอร์มีเอส แลคโตสจะเข้าสู่เซลล์ภายใต้การทำงานของเพอร์มีเอสอีกแบบหนึ่งคือ β-galactosidase ซึ่งจะย่อยสลายแลคโตสเป็นกาแลคโตสแลคโตสและกลูโคสβ-Galactosidase ยังสามารถออกฤทธิ์โดยตรงกับ ONPG เพื่อไฮโดรไลซ์ให้กลายเป็นกาแลคโตสและโอไนโตรฟีนอลสีเหลือง (ONP)สามารถทำได้ใน 24 ชั่วโมง แม้ในถังหมักแลคโตสที่ล่าช้าดังนั้นจึงอธิบายผลการสังเกตของการเก็บเชื้อ 1 จากวุ้นเอียงและเพาะเชื้อเป็นวงกลมที่อุณหภูมิ 36°C เป็นเวลา 1-3 ชม. และ 24 ชม.หากมีการสร้าง β-galactosidase ขึ้น จะเปลี่ยนเป็นสีเหลืองภายใน 1-3 ชั่วโมง หากไม่มีเอนไซม์ดังกล่าว จะไม่เปลี่ยนสีภายใน 24 ชั่วโมง
ตามเอนไซม์สองตัวข้างต้น จุลินทรีย์สามารถแบ่งออกเป็นประเภทต่อไปนี้:
1 แบคทีเรียที่หมักแลคโตส (18-24 ชั่วโมง) พร้อม permease และβ-galactosidase P + G +;
2 เครื่องหมักแลคโตสที่ล่าช้า (ใช้เวลานานกว่า 24 ชั่วโมง) ขาดการซึมผ่าน แต่มีกาแลคโตซิเดส: P- G+
3 สารหมักที่ไม่มีแลคโตสขาดทั้งเพอร์มีเอสและกาแลคโตซิเดส: P- G-
การทดสอบ ONPG สามารถใช้เพื่อแยกแยะแบคทีเรียแลคโตสที่หมักแลคโตส (P-G+) จากแบคทีเรียที่ไม่หมักแลคโตส (PG-) เช่น:
1 แยกความแตกต่างของสารหมักแลคโตสตอนปลาย (P- G+) จากสารหมักที่ไม่แลคโตส (P- G-)
(a) Citrobacter (+) และ Salmonella arizonae (+) จาก Salmonella (-)
(b) Escherichia coli (+) จาก Shigella sonnei (-)
เหตุใดการทดสอบ ONPG จึงดำเนินการโดยใช้การเพาะเลี้ยงข้ามคืนกับโซเดียมคลอไรด์ เฟอริก ไตรแซ็กคาไรด์ 3% (ไตรแซ็กคาไรด์เหล็ก)บริษัท ของเราได้ศึกษาข้อมูลจำนวนมาก แต่ไม่มีคำชี้แจงที่ชัดเจนเฉพาะบนเว็บไซต์ขององค์การอาหารและยาเท่านั้นที่เขียนไว้ว่า "เพาะเชื้อที่จะทดสอบบนวุ้นวุ้นน้ำตาลสามชั้นและบ่มเป็นเวลา 18 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37°C (หรืออุณหภูมิอื่นที่เหมาะสม ถ้าจำเป็น) สารอาหาร (หรืออื่นๆ) วุ้นวุ้นที่มีส่วนประกอบ 1.0 อาจใช้ % แลคโตส"หมายถึง: แบคทีเรียทดสอบถูกเพาะเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อไตรแซ็กคาไรด์ไอรอนและเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37°ซ เป็นเวลา 18 ชั่วโมงสามารถใช้อาหารเลี้ยงวุ้นที่มีสารอาหาร (หรืออื่นๆ) ที่มีแลคโตส 1% ได้เช่นกันดังนั้นจึงสรุปได้ว่าตัวกลางที่เป็นเหล็กไตรแซ็กคาไรด์มีแลคโตสหลังจากการเจริญเติบโตชั่วข้ามคืน แบคทีเรียได้ผลิต β-galactosidase ที่ใช้งานได้ดีการใช้แบคทีเรียดังกล่าวทำให้ ONPG สามารถย่อยสลายโดย β-galactosidase ได้เร็วขึ้นปรากฏการณ์การทดลองนั้นเร็วขึ้นและแสดงออกมาได้ดีขึ้นนอกจากนี้ การเติมโทลูอีนทีละหยดและอ่างน้ำเป็นเวลา 5 นาทีเพื่อปลดปล่อย β-galactosidase อย่างเต็มที่
