สินค้า

คาร์บอนิก แอนไฮเดรส แอคทิเวเตอร์: การศึกษาการกระตุ้นครั้งแรกของไอโซฟอร์ม VI ที่หลั่งของมนุษย์ด้วยกรดอะมิโนและเอมีน

ไอโซไซม์ที่หลั่งของคาร์บอนิกแอนไฮเดรสของมนุษย์ (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI ได้รับการโคลน แสดงออก และทำให้บริสุทธิ์ในระบบการแสดงออกของแบคทีเรียพารามิเตอร์จลนพลศาสตร์สำหรับปฏิกิริยาไฮเดรชั่นของ CO(2) พิสูจน์ว่า hCA VI มี ak(cat) เท่ากับ 3.4 x 10(5)s(-1) และ k(cat)/K(M) ที่ 4.9 x 10(7)M (-1)s(-1) (ที่ pH 7.5 และ 20 องศาเซลเซียส)hCA VI มีกิจกรรมการเร่งปฏิกิริยาที่สำคัญสำหรับปฏิกิริยาทางสรีรวิทยา โดยมีลำดับความสำคัญเท่ากันกับไอโซฟอร์ม CA I ที่แพร่หลายหรือทั่วเยื่อหุ้มเซลล์ ไอโซไซม์ที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก CA IXชุดของกรดอะมิโนและเอมีนแสดงให้เห็นว่าทำหน้าที่เป็นตัวกระตุ้น CA VI โดยมีประสิทธิภาพที่ผันแปรได้l-His, l-Trp และ dopamine แสดงผลการเปิดใช้งาน CA VI ที่อ่อนแอ (K(A)s ในช่วง 21-42 microM) ในขณะที่ d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonin และไพริดิล-อัลคิลามีนบางชนิดเป็นตัวกระตุ้นที่ดีกว่า โดยมี K(A)s อยู่ในช่วง 13-19 ไมโครโมลาร์ตัวกระตุ้น CA VI ที่ดีที่สุดคือ l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe และฮีสตามีน โดยมี K(A)s อยู่ในช่วง 1.23-9.31 ไมโครโมลาร์ตัวกระตุ้นทั้งหมดเหล่านี้เพิ่มค่า k(cat) โดยไม่มีผลต่อ K(M) ซึ่งมีส่วนร่วมในขั้นตอนการกำหนดอัตราในวัฏจักรการเร่งปฏิกิริยา ปฏิกิริยาการถ่ายโอนโปรตอนระหว่างตำแหน่งที่แอคทีฟของเอนไซม์กับสิ่งแวดล้อม