สินค้า

คล้ายกับไวรัส RNA สายบวกอื่น ๆ ไวรัสทอมบัสถูกจำลองแบบโดยคอมเพล็กซ์จำลองไวรัสที่จับกับเมมเบรน (VRC)VRC ประกอบด้วย RNA polymerase (RdRp) ที่ขึ้นกับ RNA ที่เข้ารหัสด้วยไวรัส p92, RNA chaperone ของไวรัส p33 และโปรตีนโฮสต์ที่เลือกใช้ร่วมกันหลายตัวเพื่อให้กลายเป็น RdRp ที่ใช้งานได้หลังจากการแปลแล้ว ควรรวมโปรตีนการจำลองแบบ p92 ไว้ใน VRC ตามด้วยการเปิดใช้งานก่อนหน้านี้เราได้แสดงให้เห็นในการทดสอบโดยใช้สารสกัดจากยีสต์ที่ปราศจากเซลล์ว่าการเปิดใช้งานของ Tomato bushy stunt virus (TBSV) RdRp นั้นต้องการปัจจัยโฮสต์ที่ละลายน้ำได้ในบทความนี้ เราระบุโปรตีนช็อกความร้อนระดับเซลล์ 70 (Hsp70) เป็นปัจจัยโฮสต์ที่เลือกใช้ร่วมกันซึ่งจำเป็นสำหรับการเปิดใช้งาน TBSV RdRp ชนิดรีคอมบิแนนท์ที่ปลาย N ที่ถูกตัดปลายนอกจากนี้ การปิดกั้นตามโมเลกุลขนาดเล็กของฟังก์ชัน Hsp70 ยังยับยั้งการสังเคราะห์ RNA โดย tombusvirus RdRp ในหลอดทดลองนอกจากนี้ เราแสดงให้เห็นว่าฟอสโฟลิปิดที่เป็นกลาง ได้แก่ ฟอสฟาติดิลเอทานอลเอมีน (PE) และฟอสฟาติดิลโคลีน (PC) ช่วยเพิ่มการเปิดใช้งาน RdRp ในหลอดทดลองในทางตรงกันข้าม ฟอสฟาติดิลกลีเซอรอล (PG) แสดงผลการยับยั้งที่แข็งแกร่งและโดดเด่นต่อการเปิดใช้งาน RdRp ในหลอดทดลองนอกจากนี้เรายังแสดงให้เห็นว่า PE และ PC กระตุ้นการทำงานร่วมกันของ RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA] ในขณะที่ PG ยับยั้งการจับ RNA ของไวรัสกับ RdRpจากบทบาทการกระตุ้นและยับยั้งของฟอสโฟลิพิดต่างๆ ในการเปิดใช้งาน RdRp ของไวรัส tombus เราเสนอว่าองค์ประกอบไขมันของเยื่อหุ้มเซลล์ย่อยที่เป็นเป้าหมายอาจถูกใช้โดย tombusviruses เพื่อควบคุมชุด VRC ใหม่ในระหว่างการติดเชื้อ RNA-polymerase RNA ที่ขึ้นอยู่กับรหัสไวรัส (RdRp) ซึ่งมีหน้าที่ในการสังเคราะห์ RNA ของไวรัสในเซลล์ที่ติดเชื้อของไวรัส RNA ที่เป็นสายบวกหลายตัวนั้นไม่ได้ใช้งานในตอนแรกกลยุทธ์นี้มีแนวโน้มที่จะหลีกเลี่ยงการสังเคราะห์ RNA ของไวรัสในไซโตซอลซึ่งจะนำไปสู่การกระตุ้นการตอบสนองต้านไวรัสของเซลล์ที่กระตุ้น RNA อย่างรวดเร็วในระหว่างการประกอบคอมเพล็กซ์แบบจำลองที่จับกับเมมเบรน ไวรัส RdRp จะถูกเปิดใช้งานผ่านกระบวนการที่ไม่เข้าใจอย่างสมบูรณ์ ซึ่งทำให้ RdRp สามารถสังเคราะห์อาร์เอ็นเอได้ด้วยการใช้ TBSV RdRp เราแสดงให้เห็นว่า chaperone เซลลูล่าร์ Hsp70 ที่เลือกใช้ร่วมกันและฟอสโฟลิปิดที่เป็นกลางช่วยอำนวยความสะดวกในการเปิดใช้งาน RdRp ในหลอดทดลองในทางตรงกันข้าม phosphatidylglycerol (PG) มีผลยับยั้งที่เด่นชัดต่อการเปิดใช้งาน RdRp ในหลอดทดลอง และการโต้ตอบกับ RNA ของไวรัส RdRp ซึ่งบ่งชี้ว่าไมโครโดเมนที่มีเมมเบรนรอบ ๆ RdRp ส่งผลต่อความสามารถในการสังเคราะห์ RNA อย่างมากดังนั้นการเปิดใช้งาน RdRp ของไวรัสจึงขึ้นอยู่กับส่วนประกอบของโฮสต์หลายตัวในเซลล์ที่ติดเชื้อ