สินค้า

โปรตีน ORF45 ของไวรัสเริมที่เกี่ยวข้องกับ sarcoma (KSHV) ของ Kaposi เป็นโปรตีน tegument ในช่วงต้นของไวรัสแกมมาเฮอร์พีสการศึกษาก่อนหน้านี้ของเราได้เปิดเผยถึงบทบาทที่สำคัญในการติดเชื้อ KSHV ทั้งในระยะเริ่มต้นและระยะท้ายในการศึกษานี้ เราสำรวจปฏิสัมพันธ์ของ ORF45 โดยใช้แผงโมโนโคลนอลแอนติบอดีนอกเหนือจากไคเนสที่ควบคุมนอกเซลล์ (ERK) และโปรตีน p90 ไรโบโซม S6 ไคเนส (RSK) ที่ระบุก่อนหน้านี้แล้ว เราพบโปรตีน copurified อื่นๆ อีกหลายชนิด รวมถึงโปรตีนที่โดดเด่นขนาด ∼38 kDa และ ∼130 kDaแมสสเปกโตรเมทรีพบว่าโปรตีน 38-kDa คือ ORF33 ของไวรัส และโปรตีน 130-kDa คือ USP7 ของเซลล์ (โปรตีเอส 7 เฉพาะ ubiquitin)เราแมปโดเมนที่มีผลผูกพัน ORF33 กับกรดอะมิโน 19 ขั้วคาร์บอกซิล (aa) ที่ได้รับการอนุรักษ์อย่างสูงของ ORF45 และโดเมนที่มีผลผูกพัน USP7 กับบรรทัดฐานที่สอดคล้องกันที่รายงานในภาคกลางของ ORF45การใช้การย้อมด้วยอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ เราสังเกตการรวมศูนย์ของ ORF45 ด้วย ORF33 หรือ USP7 ทั้งภายใต้สภาวะทรานส์เฟกไอออนและในเซลล์ที่ติดเชื้อ KSHVยิ่งไปกว่านั้น เราสังเกตเห็นการย้ายถิ่นที่ขึ้นกับ ORF45 ของส่วนหนึ่งของ ORF33/USP7 จากนิวเคลียสไปยังไซโตพลาสซึมเราพบว่า ORF45 ทำให้การสะสมโปรตีน ORF33 เพิ่มขึ้นซึ่งถูกยกเลิกหากโดเมนที่มีผลผูกพัน ORF33- หรือ USP7 ใน ORF45 ถูกลบนอกจากนี้ การลบคาร์บอกซิลเทอร์มินัสที่อนุรักษ์ไว้ของ ORF45 ในจีโนม KSHV ช่วยลดระดับของโปรตีน ORF33 ในเซลล์ที่ติดเชื้อ KSHV ลงอย่างมาก และยกเลิกการผลิต virions ของลูกหลานโดยรวมแล้ว ผลลัพธ์ของเราไม่เพียงแต่เปิดเผยส่วนประกอบใหม่ของการโต้ตอบ ORF45 เท่านั้น แต่ยังแสดงให้เห็นว่าการทำงานร่วมกันระหว่างโปรตีนเหล่านี้มีความสำคัญต่อการจำลองแบบ KSHV lytic ไวรัสเริมที่เกี่ยวข้องกับ sarcoma (KSHV) ของ Kaposi เป็นตัวการที่ก่อให้เกิดมะเร็งในมนุษย์หลายชนิดKSHV ORF45 เป็นโปรตีนมัลติฟังก์ชั่นที่จำเป็นสำหรับการจำลองแบบ KSHV lytic แต่กลไกที่แน่นอนซึ่ง ORF45 ทำหน้าที่สำคัญนั้นไม่ชัดเจนการศึกษาก่อนหน้าของเราเปิดเผยว่า ORF45 pr otein ทั้งหมดในเซลล์มีอยู่ในสารเชิงซ้อนที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูงดังนั้นเราจึงพยายามกำหนดลักษณะของการโต้ตอบของ ORF45 เพื่อให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับบทบาทของมันในระหว่างการจำลองแบบ lyticเราใช้แผงของโมโนโคลนอลแอนติบอดี สำรวจปฏิสัมพันธ์ของ ORF45 ในเซลล์ที่ติดเชื้อ KSHVเราระบุพันธมิตรใหม่สองตัวที่มีผลผูกพันของ ORF45: โปรตีนไวรัส ORF33 และโปรตีเอสเฉพาะเซลล์ ubiquitin 7 (USP7)เรายังแสดงให้เห็นเพิ่มเติมว่าปฏิสัมพันธ์ระหว่าง ORF45 และ ORF33 มีความสำคัญต่อการผลิตอนุภาคไวรัส KSHV อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งบ่งชี้ว่าการรบกวนเป้าหมายด้วยการโต้ตอบนี้อาจแสดงถึงกลยุทธ์ใหม่ในการยับยั้งการจำลองแบบของ KSHV lytic