สินค้า

โทโพโลยีเมมเบรนของโดเมนช่องสัญญาณ colicin E1 ได้รับการศึกษาโดยการถ่ายโอนพลังงานเรโซแนนซ์ฟลูออเรสเซนซ์ (FRET)FRET เกี่ยวข้องกับกรดอะมิโนเรืองแสงที่เข้ารหัสทางพันธุกรรม (คูมาริน) เป็นผู้ให้และซิสเทอีนเรซิดิวที่ถูกเลือกติดฉลากซึ่งผูกไว้กับ DABMI (4-(ไดเมทิลอะมิโน)ฟีนิลลาโซฟีนิล-4'-มาเลอิไมด์) เป็นตัวรับ FRETคูมารินเรซิดิวเรืองแสงถูกรวมเข้าไว้ในโปรตีนผ่านทางคู่ซินทีเทส tRNA/อะมิโนเอซิล-tRNA แบบมุมฉากที่อนุญาตให้รวมเข้าแบบเลือกเข้าไปในตำแหน่งใดๆ ภายในโดเมนช่องโคลิซินตัวแปรแต่ละตัวมีการกลายพันธุ์แบบหยุด (TAG) สำหรับการรวมตัวกันของ coumarin และการกลายพันธุ์ของซิสเทอีน (TGT) สำหรับการแนบ DABMIระยะห่างระหว่างเกลียวหกระยะภายในเอนริเก้ 1-6 ถูกกำหนดหาโดยใช้การวิเคราะห์ FRET สำหรับทั้งสถานะที่ละลายน้ำได้และที่จับกับเมมเบรนข้อมูล FRET แสดงการเปลี่ยนแปลงอย่างมากในระยะห่างระหว่างเกลียวระหว่างเอนริเก้ 3-6 ตามการเชื่อมโยงของเมมเบรนซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกใหม่เกี่ยวกับโครงสร้างที่จับกับเมมเบรนของโดเมนช่องสัญญาณโดยทั่วไป ประสิทธิภาพ coumarin-DABMI FRET interhelical ลดลงตามการยึดเกาะของเมมเบรน ซึ่งสร้างขึ้นจากแบบจำลองร่มสำหรับช่องโคลิซินแบบจำลองเบื้องต้นสำหรับสถานะปิดของโดเมนแชนเนลได้รับการพัฒนาขึ้นจากข้อมูล FRET ปัจจุบันและที่เผยแพร่ก่อนหน้านี้แบบจำลองแนะนำการจัดเรียงแบบวงกลมของเอนริเก้ 1-7 ในทิศทางตามเข็มนาฬิกาจากด้านนอกเซลล์และการเชื่อมโยงระหว่างเยื่อหุ้มเซลล์ของเอนริเก้ 1, 6, 7 และ 10 รอบกิ๊บเมมเบรนกลางที่เกิดจากเอนริเก้ 8 และ 9