สินค้า

เซลล์ยูคาริโอตประกอบด้วยดีออกซีไรโบนิวคลีโอไซด์ ไตรฟอสเฟต (dNTPs) สี่ชนิดในปริมาณที่ละเอียดอ่อน ซึ่งเพียงพอสำหรับการจำลองแบบของดีเอ็นเอเพียงไม่กี่นาทีเท่านั้นทั้งการขาดและเกินของ dNTP ตัวเดียวอาจส่งผลให้อัตราการกลายพันธุ์เพิ่มขึ้น การซ่อมแซม DNA ที่ผิดพลาด หรือการสูญเสีย DNA ของไมโทคอนเดรียโดยปกติแล้ว dNTP จะถูกหาปริมาณโดยการทดสอบด้วยเอนไซม์ ซึ่งการรวมตัวของกัมมันตภาพรังสี dATP (หรือ dTTP กัมมันตภาพรังสีในการทดสอบสำหรับ dATP) เข้าไปในโอลิโกนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ที่จำเพาะโดย DNA พอลิเมอเรสเป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของ dNTP ที่ไม่รู้จักเราพบว่า Klenow DNA polymerase ที่ใช้กันทั่วไปอาจแทนที่ไรโบนิวคลีโอไทด์ที่สอดคล้องกันสำหรับ dNTP ที่ไม่รู้จักซึ่งนำไปสู่การประเมินค่า dNTP สูงเกินไปในบางกรณีตอนนี้เราอธิบายเงื่อนไขการทดสอบสำหรับแต่ละ dNTP ที่หลีกเลี่ยงการรวมตัวของไรโบนิวคลีโอไทด์สำหรับการทดสอบ dTTP และ dATP นั้นเพียงพอแล้วที่จะลดความเข้มข้นของเอนไซม์ Klenow และของ dATP ที่ติดฉลาก (หรือ dTTP)สำหรับ dCTP และ dGTP เราต้องแทนที่เอนไซม์ Klenow ด้วย Taq DNA polymerase หรือ Thermo Sequenaseเราแนะนำว่าในรายงานบางฉบับก่อนหน้านี้ การรวมตัวของไรโบนิวคลีโอไทด์อาจทำให้ค่า dGTP และ dCTP สูงเกินไป