X-GAL CAS:7240-90-6 98% สีขาวเป็นผงผลึกสีขาวนวล
หมายเลขแคตตาล็อก | XD90008 |
ชื่อผลิตภัณฑ์ | X-Gal (5-โบรโม-4-คลอโร-3-อินโดลิล-เบตา-ดี-กาแลคโตไพราโนไซด์) |
CAS | 7240-90-6 |
สูตรโมเลกุล | C14H15BrClNO6 |
น้ำหนักโมเลกุล | 408.63 |
รายละเอียดการจัดเก็บ | -2 ถึง -6 °C |
รหัสภาษีที่สอดคล้องกัน | 29400000 |
คุณสมบัติของผลิตภัณฑ์
ลักษณะที่ปรากฏของโซลูชัน | สารละลายใส ไม่มีสีถึงเหลืองอ่อน (50 มก./มล. ใน DMF:MeOH, 1:1) |
การหมุนด้วยแสงเฉพาะ | -61.5 +/- 1 |
รูปร่าง | ผงผลึกสีขาวเป็นสีขาว |
ความบริสุทธิ์ HPLC | ขั้นต่ำ 99% |
ความสามารถในการละลาย (5 % ใน DMF) | ละลายน้ำได้ (5% w/v,DMF) |
น้ำเคเอฟ | สูงสุด 1% |
การทดสอบ (HPLC บนพื้นฐานปราศจากน้ำ) | ขั้นต่ำ 98% w/w |
การใช้ X-gal
X-gal (เรียกสั้น ๆ ว่า BCIG สำหรับ 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) เป็นสารประกอบอินทรีย์ที่ประกอบด้วยกาแลคโตสที่เชื่อมโยงกับอินโดลที่ถูกแทนที่สารประกอบนี้ถูกสังเคราะห์โดย Jerome Horwitz และผู้ทำงานร่วมกันในปี 1964 ชื่อทางเคมีที่เป็นทางการมักถูกทำให้สั้นลงเพื่อให้มีความแม่นยำน้อยลงแต่ยังมีวลีที่ยุ่งยากน้อยกว่า เช่น bromochloroindoxyl galactosideX จาก indoxyl อาจเป็นแหล่งที่มาของ X ในการหดตัวของ X-galX-gal มักถูกใช้ในอณูชีววิทยาเพื่อทดสอบการมีอยู่ของเอนไซม์ β-galactosidase แทนที่ β-galactoside ซึ่งเป็นเป้าหมายตามปกตินอกจากนี้ยังใช้เพื่อตรวจหากิจกรรมของเอนไซม์นี้ในฮิสโตเคมีและแบคทีเรียวิทยาX-gal เป็นหนึ่งในสารอินด็อกซิลไกลโคไซด์และเอสเทอร์หลายชนิดที่ให้สารประกอบสีน้ำเงินที่ไม่ละลายน้ำคล้ายกับสีย้อมครามอันเป็นผลมาจากการไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์ที่เร่งปฏิกิริยา
X-gal เป็นสารอะนาล็อกของแลคโตส ดังนั้นจึงอาจถูกไฮโดรไลซ์โดยเอนไซม์ β-galactosidase ซึ่งทำลายพันธะ β-glycosidic ใน D-แลคโตสX-gal เมื่อแยกออกโดย β-galactosidase จะได้กาแลคโตสและ 5-โบรโม- 4-คลอโร-3-ไฮดรอกซีอินโดล - 1 หลังจากนั้นจะลดขนาดลงเองตามธรรมชาติและถูกออกซิไดซ์เป็น 5,5'-ไดโบรโม-4,4'-ไดคลอโร -indigo - 2 ผลิตภัณฑ์สีน้ำเงินเข้มข้นที่ไม่ละลายน้ำX-gal เองไม่มีสี ดังนั้นการมีอยู่ของผลิตภัณฑ์สีฟ้าจึงอาจใช้เป็นการทดสอบการมีอยู่ของ β-galactosidase ที่ทำงานอยู่นอกจากนี้ยังช่วยให้แบคทีเรีย β-galactosidase (เรียกว่า lacZ) ใช้เป็นนักข่าวในการใช้งานต่างๆ
ในการวิเคราะห์แบบลูกผสมสองตัว อาจใช้ β-galactosidase เป็นตัวรายงานเพื่อระบุโปรตีนที่มีปฏิสัมพันธ์ซึ่งกันและกันในวิธีนี้ ห้องสมุดจีโนมอาจถูกคัดกรองสำหรับปฏิสัมพันธ์ของโปรตีนโดยใช้ระบบยีสต์หรือแบคทีเรียในที่ที่มีอันตรกิริยาที่ประสบความสำเร็จระหว่างโปรตีนที่ถูกคัดกรอง มันจะส่งผลให้เกิดการผูกมัดของโดเมนกระตุ้นกับโปรโมเตอร์หากโปรโมเตอร์เชื่อมโยงกับยีน lacZ การผลิต β-galactosidase ซึ่งส่งผลให้เกิดการก่อตัวของโคโลนีที่มีเม็ดสีสีน้ำเงินเมื่อมี X-gal จะบ่งชี้ถึงการทำงานร่วมกันที่ประสบความสำเร็จระหว่างโปรตีนเทคนิคนี้อาจถูกจำกัดให้คัดกรองคลังที่มีขนาดน้อยกว่าประมาณ 106 การแยก X-gal ที่ประสบความสำเร็จยังสร้างกลิ่นเหม็นอย่างเห็นได้ชัดเนื่องจากการระเหยของอินโดล
เนื่องจากตัว X-gal เองนั้นไม่มีสี การมีอยู่ของผลิตภัณฑ์สีฟ้าอาจถูกใช้เป็นการทดสอบการมีอยู่ของ β-galactosidase ที่ทำงานอยู่
การระบุเอนไซม์ที่ใช้งานได้ง่ายทำให้สามารถใช้ยีนของ βgalactosidase (ยีน lacZ) เป็นยีนนักข่าวในการใช้งานต่างๆ